Este estudio investigó el efecto de los métodos de enseñanza en el rendimiento académico de los estudiantes de biología de la escuela secundaria mixta y de los estudiantes de un solo sexo, utilizando un diseño de investigación cuasi-experimental. El tamaño de la muestra fue de 323 estudiantes de segundo ciclo de enseñanza secundaria de 23 escuelas secundarias superiores de las áreas de gobierno local de Yenagoa y Ogbia, de una población de 6.988 estudiantes de segundo ciclo de enseñanza secundaria que ofrecen Biología como asignatura en la escuela secundaria superior del Estado de Bayelsa. Se utilizaron una pregunta de investigación y una hipótesis. La Guía sobre el Método de Enseñanza Expositiva, la Guía sobre el Método de Enseñanza de Debate y la Guía sobre el Método de Enseñanza Demostrativa fueron guías fiables y validadas utilizadas por los profesores sobre cómo utilizar los métodos de enseñanza. La prueba estandarizada de rendimiento en Biología se adoptó como instrumento fiable para la recogida de datos. Para el análisis de los datos se utilizaron los estadísticos de porcentaje, media, desviación estándar y prueba z. Los resultados revelaron que no hay diferencias significativas en las puntuaciones medias de los alumnos de segundo curso de las escuelas mixtas y de un solo sexo a los que se enseña con el método de demostración en el rendimiento académico en Biología.